31st Annual Congress of Turkish Pediatric Surgical Association

Aim: Intestinal ischemia/reperfusion (I/R) injury is a serious clinical condition seen in mesenteric emboli, midgut volvulus, invagination, necrotizing enterocolitis. Colchicine (CN) and low-dose methotrexate (MTX) are used in several clinical conditions for their anti-inflammatory features. We conducted an experimental intestinal I/R model to investigate CN and MTX effect to intestinal I/R injury.

Methods: 24 rats were included to study. No intervention was done in control group (CG, n:6). In experimental groups, after anesthetized with ketamin-hydrochloride laparotomy and superior mesenteric artery occlusion was performed. After 1 hour ischemia reperfusion (1 hour) was started by de-occlusion. 30 min before reperfusion saline in sham group (SG, n:6), CN (1 mg/kg) in CN group (CNG, n:6), MTX (0.1 mg/kg) in MTX group (MTXG, n:6) were infused intraperitoneally. Small intestines of the same location were harvested in all groups at the end of experiments. Samples were evaluated histopathologically for Chiu score (intestinal mucosal injury score) and biochemically for oxidative stress markers. Results were evaluated with Kruskal-Wallis test.

Results: Biochemically, MDA levels were significantly low in CG compared to SG, CNG, MTXG (p<0.05). NO levels were significantly low and SOD levels were significantly high in CG compared to MTXG (p<0.05). Histopathologically, Chiu score was significantly low in CG compared to SG, CNG, MTXG (p<0.05), and significantly higher in MTXG than in SG and CNG (p<0.05).

Conclusion: The present experimental model caused I/R injury in rat intestines. Contrary to literature, it is found that MTX worsens intestinal I/R injury and CN not improve intestinal I/R injury.

Amaç: İntestinal iskemi reperfüzyon (I/R) hasarı mezenter embolisi, orta barsak volvulusu, invajinasyon, nekrotizan enterokolit gibi klinik durumlarda görülen ciddi bir tablodur. Kolşisin (KSN) ve düşük doz methotrexate (MTX) anti-inflamatuar özelikleri nedeniyle çeşitli durumlarda kullanılan ilaçlardır. Bu çalışmada intestinal I/R hasarı oluşturulması ve deneysel intestinal I/R modelinde KSN ve MTX etkisinin araştırılması amaçlanmıştır.

Gereç/Yöntem: Çalışma toplam 24 sıçan kullanılmıştır. Kontrol grubuna (KG, n:6) bir girişim yapılmamıştır. Deney gruplarında ketamin hidroklorür ile anestezi sonrası laparotomi yapılıp superior mezenter arterleri klemplenmiştir. 1 saatlik iskemi süresi sonrası klempler açılarak 1 saatlik reperfüzyon süreci başlatılmıştır. Reperfüzyondan 30 dk önce periton içine sham grubunda (SG, n:6) serum fizyolojik, KSN grubunda (KSNG, n:6) kolşisin (1 mg/kg), MTX grubunda (MTXG, n:6) methotrexate (0.1 mg/kg) verilmiştir. Deney sonunda tüm gruplarda ince barsaklar aynı yerden olacak şekilde örneklenmiştir. Alınan örnekler histopatolojik olarak barsak hasarı açısından değerlendirilip Chiu skoruna (intestinal mukozal hasar skoru) göre skorlanmıştır. Biyokimyasal olarak oksidatif stres belirteçleri çalışılmıştır. Elde edilen veriler Kruskal Wallis testi ile değerlendirilmiştir.

Bulgular: Biyokimyasal olarak, MDA seviyeleri KG’da SG, KSNG ve MTXG’na göre anlamlı derecede düşük bulunmuştur (p<0.05). KG’ da MTXG’na göre NO seviyeleri anlamlı derecede düşük, SOD seviyeleri anlamlı derecede yüksek bulunmuştur (p<0.05). Histopatolojik olarak, KG’ da Chiu skoru SG, KSNG ve MTXG’na göre anlamlı derecede düşük bulunmuştur (p<0.05). Chiu skoru MTXG’da SG ve KSNG’na göre anlamlı derecede yüksek bulunmuştur (p<0.05).

Sonuç: Sonuçlar uygulanan deneysel modelin barsaklarda I/R hasarı oluşturduğunu göstermektedir. Literatür bilgisinin aksine düşük doz MTX’in intestinal I/R hasarını kötüleştirdiği ve KSN’in I/R hasarına olumlu etkisinin olmadığı görülmüştür.