36th Annual Congress of Turkish Pediatric Surgical Association and 3rd Annual Congress of IPEG-MEC

View Abstract

Oral Presentation - 51

Investigation of Epithelial-Mesenchymal Transition in Adult Indirect Inguial Hernia and Child Indirect Inguinal Hernia

S Somuncu*, ÖS Somuncu**, B Ballıca***, B Tabandeh****
*Bahçeşehir University Faculty of Medicine Department of Pediatric Surgery
**Bahçeşehir University Faculty of Medicine Department of Genetic and Molecular Biology
***Bahçeşehir University Faculty of Medicine
****Bahçeşehir University Faculty of Medicine Department of General Surgery

Background

Epithelial-mesenchymal transition(EMT) describes a series of rapid changes in cellular phenotype. During EMT,epithelial cells down-modulate cell-cell adhesion structures,alter polarity,reorganize their cytoskeleton,and become isolated,motile,and resistant to anoikis.EMT is applied to distinct biological events as if it were a single conserved process,in fact EMT-related processes can differ in intensity from a transient loss of cell polarity to the total cellular reprogramming.Studies proposed that EMT,epithelial breakdown and epithelial cell migration are key processes in the obliteration of PV.The majority of abnormalities covering indirect inguinal hernias are due to non-obliteration or incomplete fusion of PV.

Methods

Total RNA isolations were made from adult and child inguinal hernia sacs and control peritoneum samples.Relative Keratin1,Keratin15,Filaggrin2 and STAT3 mRNA expressions were analyzed via qPCR. Indirect inguinal hernia sac cells were grown in vitro.Child cells were employed to immunocytochemistry(ICC) analysis for Cytokeratin15,Filaggrin2 and Bcl-2.Adult indirect inguinal hernia cells were also examined for H3 modifications.

Results

The results indicated relatively significant mRNA expressions. In child indirect inguinal hernia, Keratin expressions were found higher than their controls.They were also meaningfully lower than the healthy group in adult indirect inguinal hernia.Keratin15, Keratin1 and Filaggrin2 expressions were all correlating since they all are members of related pathways.STAT3 expressions were opposite to Keratin and Filaggrin expressions suggesting that adult cells might have a switch to the mesenchymal state from epithelial state.In child, the disease progression seemed to be congenital whereas in the adult it was supposed to be through EMT with the effects of epigenetics.

Conclusion

Irregular change of EMT associated genes may play in the development of indirect inguinal hernia.Hence, the information on the epigenetic regulation of EMT in patients with primary inguinal hernia can aid to comprehend the pathogenesis of primary inguinal hernia in adults and infers new therapeutic approaches for this disease.Epigenetics was not thought to contribute to the disease evolution in child.

Erişkin İndirekt İnguinal Herni ve Çocuk İndirekt İnguinal Herni’de Epitelyal-Mezenkimal Geçişin Araştırılması

S Somuncu*, ÖS Somuncu**, B Ballıca***, B Tabandeh****
*Bahçeşehir Üniversitesi Tıp Fakültesi Çocuk Cerrahisi Anabilim Dalı
**Bahçeşehir Üniversitesi Tıp Fakültesi Genetik ve Moleküler Biyoloji Anabilim Dalı
***Bahçeşehir Üniversitesi Tıp Fakültesi
****Bahçeşehir Üniversitesi Tıp Fakültesi Genel Cerrahi Anabilim Dalı

Giriş

Epitelyal-mezenkimal geçiş, hücresel fenotipte bir seri hızlı değişimi tanımlar. EMT sırasında epitel hücreler hücre adezyon yapılarını modüle eder, polaritelerini değiştirir, hücre iskeletlerini yeniden düzenlerler ayrıca hareketli ve anoikise dirençli hale gelirler. EMT terimi, genellikle tek bir hücresel süreç gibi ifade edilse de EMT ile ilişkili süreçler, hücre polaritesinin geçici bir kaybından, toplam hücresel yeniden programlamaya kadar, yoğunluğa göre farklılık gösterebilir. Önceki çalışmalar, EMT, epitelyal yıkım ve epitel hücre göçünün, processus vaginalisin yok edilmesinde rol oynayan kilit süreçler olduğunu ileri sürmüştür. İndirek inguinal hernileri oluşturan anormalliklerin büyük çoğunluğu, Processus vajinalisin obliterasyon veya eksik füzyonundan kaynaklanmaktadır.

Yöntemler

Bu çalışmada yetişkin ve çocuk indirek inguinal herni keselerinden ve kontrol periton örneklerinden RNA izolasyonu yapıldı. Relativ Keratin1, Keratin15, Filaggrin2 ve STAT3 mRNA ekspresyonları, kantitatif gerçek zamanlı PCR ile analiz edildi. İndirek inguinal herni kesesi hücreleri kültürlendi ve in vitro ortamda büyütüldü. Çocuk hastalardan elde edilen hücreler, Cytokeratin15, Filaggrin2 ve Bcl-2 için immünositokimya (ICC) analizi ile incelendi. Erişkin inguinal herni hücreleri ise, ICC ile H3 modifikasyonları açısından incelendi.

Sonuçlar

Sonuçlar anlamlı mRNA ekspresyonu göstermiştir. Çocuk indirek inguinal hernide Keratin ekspresyonu kontrollerinden daha yüksek bulunmuştur. Ayrıca yetişkin indirek inguinal hernide sağlıklı gruptan anlamlı derecede daha düşük gösterilmiştir. Genel olarak, Keratin 15, Keratin 1 ve Filaggrin 2 ekspresyonlarının hepsi, ilgili yolakların üyeleri olması ile ilişkilendirilmiştir. STAT3 ekspresyonları, yetişkin hücrelerin epitelyal durumdan mezenkimal duruma geçebileceğini düşündüren ekspresyonlarda bulunmuşlardır. Genellikle çocukta, hastalığın ilerlemesi konjenital gibi görünürken, erişkinlerde epigenetik etkilerle EMT aracılığıyla olması sonuç olarak gösterilmiştir.

Çıkarımlar

Epitelyal-mezenkimal geçişle ilişkili genlerin düzensiz değişiminin indirek inguinal herni gelişiminde rol oynayabileceği sonucuna vardık. Bu nedenle, primer indirek inguinal herni hastalarında EMT'nin epigenetik regülasyonu hakkındaki bilgiler, erişkinlerde primer inguinal herninin patogenezini anlamaya yardımcı olabilir ve bu hastalık için yeni terapötik yaklaşımlar geliştirmeye yardımcı olacaktır. Çocukta indirek inguinal herni gelişiminde epigenetiğin erişkindeki gibi etkili olduğu değil konjenital olduğu düşünülmektedir.

Close