EN
TÜRKÇE
Oral Presentation - 12
Necrotizing enterocolitis in newborn rats is improved by nesfatin-1 via the modulation of inflammation-related transcription factors and tight junction proteins
Kıvılcım Karadeniz Cerit 1, Türkan Koyuncuoglu 2, Damla Yagmur 3, Damla Anıl 4, İrem Peker Eyüboğlu 5, Serap Sirvancı 4, Mustafa Akkiprik 5, Burak Aksu 6, Tolga E Dağlı 1, Berrak Yeğen 2
1 Marmara University School of Medicine, Department of Pediatric Surgery, Istanbul
2 Marmara University, School of Medicine, Department of Physiology, Istanbul
3 Marmara University School of Medicine
4 Marmara University, School of Medicine, Department of Histology and Embryology, Istanbul
5 Marmara University School of Medicine, Medical Biology
6 Marmara University School of Medicine, Department of Medical Microbiology
Aim:It was aimed to investigate therapeutic impact of nesfatin-1 and involvement of capsaicin-sensitive afferent neuronsina neonatal rat model of necrotizing enterocolitis (NEC).
Methods: To induce NEC, newborn Sprague-Dawley rat pups were separated and fed with a hyperosmolar formula, while control pups (n=16) had no intervention. NEC-induced rats received intraperitoneally saline or nesfatin-1 (0.2 µg/kg/day) for 3 days, while a subgroup of nesfatin-treated rats was injected with capsaicin (50 g/g) once on the 3rdday. On the 3rdday, pups were exposed to hypoxic chamber for 45 sec. After clinical states of pups were assessed using a clinical sickness score on 4thday, pups were sacrificed and intestinal tissues were macroscopically scored. UsingRT-PCR, gene expressions of occludin, claudin-3, cycloxygenase-2, nuclear factor (NF)-κB-p65 (RELA), and vascular endothelial growth factor (VEGF) were determined in intestines, and relative abundance of bacteria in feces were quantified by qPCR. Immunohistochemical staining for NF-κB and VEGF was performed in terminal ileum.
Main Results: Along with the increased abundance of Proteobacteria and Actinobacteria, clinical and macroscopic scores of intestine, gene expressions of claudin-3 and RELA, and NF-κB immunoreactivity were higher in saline-treated NEC group as compared to control rats (p<0.001). Nesfatin-1 reduced the macroscopic and clinical scores (p<0.001), while these reductions were abolished by capsaicin. Increased expressions of occludin, claudin-3, cycloxygenase-2 and RELA genes along with increased VEGF immunostaining were evident in nesfatin-1-treated NEC group (p <0.05).
Conclusion:Nesfatin-1 alleviated NEC-induced injury by modulating microbiota, expressions of inflammation-related transcription factors and tight junction proteins.
Nesfatin-1 inflamasyonla ilişkili transkripsiyon faktörleri ve tight-junction proteinleri yoluyla nekrotizan enterokolitte düzelme sağlar
Kıvılcım Karadeniz Cerit 1, Türkan Koyuncuoglu 2, Damla Yagmur 3, Damla Anıl 4, İrem Peker Eyüboğlu 5, Serap Sirvancı 4, Mustafa Akkiprik 5, Burak Aksu 6, Tolga E Dağlı 1, Berrak Yeğen 2
1 Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi, Çocuk Cerrahisi AD, İstanbul
2 Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi, Fizyoloji Anabilim Dalı, İstanbul
3 Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi
4 Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, İstanbul
5 Marmara Üniversitesi Tıp Fakütesi, Medikal Biyoloji AD
6 Marmara Üniversitesi Tıp Fakültesi, Medikal Mikrobiyoloji AD
Amaç:Yenidoğan sıçanlarda oluşturulan nekrotizan enterokolit (NEK) modelinde nesfatin-1’in kapsaisin duyarlı afferent nöronları yoluyla olan tedavi edici etkisini araştırmayı amaçlamıştır.
Yöntem: YenidoğanSprague-Dawley sıçanlar annelerinden ayrılıp, hiperozmolar formüllü mamalar ile beslenerek NEK modeli oluşturulmuştur, kontrol grubunda ise hiçbir müdahale yapılmamıştır (n=16). NEK oluşturulan sıçanlara, 3 gün süresince intraperitoneal olarak serum fizyolojik veya nesfatin-1 (0.2 µg/kg/day) uygulanmıştır. Nesfatin uygulan sıçanların bir alt grubuna ise 3. Günde tek sefer 50 mg/g kapsaisin ugyulanmıştır. 3.günde yavrular 45 saniye hipoksik bölmeye yerleştirlmişlerdir. Klinik durumları, klinik hastalık skoru ile değerlendirildikten sonra yavrular 4. Günde sakrifiye edilmişlerdir. İntestinal dokuları makroskopik olarak skorlanmışlardır. RT-PCR kullanılarak; occludin, claudin-3, cycloxygenase-2, nuclear factor (NF)-κB-p65 (RELA), and vascular endothelial growth factor (VEGF) gen ekspresyonu intestinal dokularda değerlendirilmiştir. Feçesteki relative bakteri baskınlığı qPCR ile değerlendirilmiştir. Terminal ileumda, NF-κB and VEGF için immunohistokimyasal boyama uygulanmıştır.
Sonuç: Saline tedavi uygulanan NEK grubunda kontrol grubuna göre;Proteobacteria and Actinobacteria oranında artış yanısıra, intestinede klinik ve makroskopik skorlarında, claudin-3 ve RELAgen ekspresyonlarında, NF-κB immunoreaktivitesi daha yüksek izlenmiştir (p<0.001). Nesfatin-1 makroskopik ve klinik skorları azaltırken, kapsaisin ile bu azalmalar ortadan kalkmaktadır. Nesfatin-1 tedavisi alan NEK grubunda Increased expressions of occludin, claudin-3, cycloxygenase-2 ve RELA gen ekspresyonları artışının yanısıra VEGF immunboyamalarında da artış bulunmuştur (p <0.05).
Nesfatin-1, NEK ile indüklenen hasarda azalmayı mikrobiatanın ve inflamasyon ilişkili transkripsiyon faktörleri ve tight junction proteinlerinin düzenlenmesi ile oluşturur.