EN
TÜRKÇE
Oral Presentation - 32
Protective Effect of Sildenafil Against Intestinal Necrosis and Apoptosis in Rat Pups with Necrotizing Enterocolitis
Şenay Kurtuluş 1, Hakan Aylanç 2, Rahime Özlem Öztopuz 3, İhsan Karaboğa 4
1 Çanakkale Onsekiz Mart University Faculty of Medicine, Department of Pediatric Surgery
2 Canakkale Onsekiz Mart University, School of Medicine, Department of Pediatrics
3 Canakkale Onsekiz Mart University Faculty of Medicine, Department of Biophysics
4 Kırklareli University Health Sciences Main Field, Histology and Embryology
Background and aim: Necrotizing Enterocolitis (NEC) is an ischemic necrosis of the intestine. To investigate the protective effects of sildenafil on apoptosis in NEC-induced rat pups.
Materials and methods: Seventy-five 15-day-old Wistar Albino rat pups were randomly divided into six groups as control (n=7), Sham (n=8), SF+DMSO (n = 15), Sil_1mg (n = 15), Sil_5mg (n = 15), Sil_10mg (n = 15). No application was made to the control group, and the experiment was carried out without any medication in the Sham group. NEC induction was performed using hypoxia/asphyxia, formula feeding, and cold stress. Rats in the SF+DMSO group were given 10 µL SF+DMSO IP (intraperitoneally). Rats in the Sildenafil groups were given 1,5 and 10mg/kg/day Sildenafil citrate IP respectively. The animals were sacrificed 48 hours later, and the ileum was removed and stained with Hematoxylin-Eosin and Masson trichrome. The prepared sections were used for histochemical and immunohistochemical caspase-3 labelling. The expression levels of hypoxia-inducible factor 1α (HIF-1α), Bax and Bcl-2 were determined using RT-PCR.
Results: The NEC histological grade, apoptosis histological score, and caspase-3 immunoreactivity were lower in the Sil-10 mg group compared to the Sham group. In the Sil-10 mg group, the messenger RNA expression of the apoptotic gene, Bax, was decreased, but not that of Bcl-2. The Bax/Bcl-2 protein ratio was also reduced in this group. Histological analysis showed that the protective effect of apoptosis was more effective in the Sil-10 mg group than in the NEC and other Sil groups.
Conclusion: We observed a protective effect of sildenafil at 10 mg/kg/day on intestinal segments, reducing necrosis and apoptosis in NEC.
Nekrotizan Enterokolitli Sıçan Yavrularında Bağırsak Nekrozu ve Apoptozuna Karşı Sildenafilin Koruyucu Etkisi
Şenay Kurtuluş 1, Hakan Aylanç 2, Rahime Özlem Öztopuz 3, İhsan Karaboğa 4
1 Çanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi Tıp Fakültesi Çocuk Cerrahisi Anabilim Dalı
2 Çanakkale Üniversitesi Tıp Fakültesi, Dahili Tıp Bilimleri. Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları AD
3 Çanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi Tıp Fakültesi, Temel Tıp Bilimleri, Biyofizik AD
4 Kırklareli Üniversitesi Sağlık Bilimleri Temel Alanı,Histoloji ve Embriyoloji
Arka plan ve amaç: Nekrotizan Enterokolit (NEC), bağırsağın iskemik nekrozudur. Sildenafilin NEC kaynaklı sıçan yavrularında apoptoz üzerindeki koruyucu etkilerini araştırmak.
Materyaller ve yöntemler: Yetmiş beş adet 15 günlük Wistar Albino sıçan yavrusu rastgele kontrol (n=7), Sham (n=8), SF+DMSO (n=15), Sil_1mg (n=15), Sil_5mg (n=15), Sil_10mg (n=15) olmak üzere altı gruba ayrıldı. Kontrol grubuna herhangi bir uygulama yapılmadı ve Sham grubunda herhangi bir ilaç kullanılmadan deney gerçekleştirildi. NEC indüksiyonu hipoksi/asfiksi, formül beslenme ve soğuk stresi kullanılarak gerçekleştirildi. SF+DMSO grubundaki sıçanlara 10 µL SF+DMSO IP (intraperitoneal) verildi. Sildenafil gruplarındaki sıçanlara sırasıyla 1,5 ve 10 mg/kg/gün Sildenafil sitrat IP verildi. Hayvanlar 48 saat sonra öldürüldü ve ileum çıkarıldı ve Hematoksilen-Eozin ve Masson trikrom ile boyandı. Hazırlanan kesitler histokimyasal ve immünohistokimyasal kaspaz-3 etiketlemesi için kullanıldı. Hipoksiye neden olan faktör 1α (HIF-1α), Bax ve Bcl-2'nin ifade düzeyleri RT-PCR kullanılarak belirlendi.
Sonuçlar: NEC histolojik derecesi, apoptozis histolojik skoru ve kaspaz-3 immünoreaktivitesi Sil-10 mg grubunda Sham grubuna kıyasla daha düşüktü. Sil-10 mg grubunda apoptotik gen Bax'ın haberci RNA ifadesi azaldı, ancak Bcl-2'ninki azalmadı. Bax/Bcl-2 protein oranı da bu grupta azaldı. Histolojik analiz, apoptozun koruyucu etkisinin Sil-10 mg grubunda NEC ve diğer Sil gruplarından daha etkili olduğunu gösterdi.
Sonuç: 10 mg/kg/gün dozunda sildenafilin NEC'de nekrozu ve apoptozu azalttığını gözlemledik.